小鼠58因子代谢研究组合
CD47是一种广泛表达的与免疫逃避有关的细胞表面糖蛋白。与主要在髓细胞上表达的抑制性受体信号调节蛋白α（SIRPα）的相互作用通常起到限制效应器功能（如吞噬和免疫细胞内稳态）的作用。CD47/SIRPα拮抗剂，通常被称为“巨噬细胞检查点”抑制剂，正被开发为癌症干预措施。SRF是一种全人IgG4抗CD47抗体，目前正在一期临床试验中进行评估。美国食品和药物管理局(FDA)已授予孤儿药SRF为多发性骨髓瘤患者的治疗，抗体能够增加骨髓瘤细胞的吞噬作用并在临床前模型中缩小肿瘤，本文报道了SRF的发展和临床前特征。
本文使用一些分析方案研究SRF引发CD47/SIRPα阻断及其红细胞吞噬功能和凝集功能的影响。此外，使用巨噬细胞：肿瘤细胞体外共培养系统研究了SRF介导的吞噬作用和细胞死亡。在这些共培养体系中进行了进一步的机制研究，以确定SRF介导的抗肿瘤活性对Fc受体结合与CD47/SIRPα阻断的依赖性。在体内，SRF在各种血液学异种移植模型中进行评估，并且在SRF治疗后使用细胞因子和巨噬细胞浸润分析评估抗肿瘤活性的机制。
药品名称：SRF
靶点：CD47
公司：SurfaceOncology
血浆和肿瘤细胞因子及免疫球蛋白测定
通过心脏穿刺对小鼠进行终末期出血，并将血液收集到EDTA管中。样品立即离心并校准。肿瘤组织收集于溶血素基质A，orangetube。加入裂解缓冲液，用FastPrep使组织均匀化。用高灵敏度（亚pg/ml），仅需微量样品（25-10ul）的MSDV-Plex细胞因子多因子检测试剂盒检测小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α（MIP-1α）和小鼠趋化蛋白1（MCP-1）细胞因子。
在MSD超敏多因子电化学发光分析（超敏多因子电化学发光分析仪：SQS）上读取板块。
在HL-60异种移植模型中，在单次注射同型对照抗体（SRF）后27和48小时产生肿瘤裂解物，并对巨噬细胞细胞因子进行评估。在这项研究中，从SRF治疗的小鼠的肿瘤裂解物中，MCP-1和相关的巨噬细胞趋化剂MIP-1α在27小时内升高，在48小时仍升高。
SRF与CD47结合，阻断CD47/SIRPα相互作用，不引起血凝和红细胞吞噬。SRF通过吞噬和细胞死亡在体外发挥抗肿瘤活性，其方式依赖于激活Fcγ受体（FcγR）CD32a，SRF与巨噬细胞源性CD32a的结合具有双重作用：诱导FcγR介导的癌细胞吞噬，并作为支架将CD47介导的死亡信号导入肿瘤细胞。作为单一药物或与利妥昔单抗联合使用，在多个血液学异种移植模型中都具有强大的抗肿瘤活性。在荷瘤小鼠中，SRF增加了肿瘤巨噬细胞的浸润和巨噬细胞细胞因子、小鼠趋化蛋白1和巨噬细胞炎性蛋白1α的诱导。巨噬细胞耗竭导致SRF抗肿瘤活性降低，强调了SRF与巨噬细胞结合的机制作用。
SRF通过细胞凋亡和吞噬作用诱导抗肿瘤活性，其作用机制与FcγR、CD32a有关。
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